艾滋病合并隐球菌性脑膜炎探索

艾滋病合并隐球菌性脑膜炎探索 本文关键词：脑膜炎，球菌，艾滋病，合并，探索

艾滋病合并隐球菌性脑膜炎探索 本文简介：摘要：目的探讨艾滋病（ＡＩＤＳ）合并隐球菌性脑膜炎（ＣＭ）患者脑脊液检测指标的变化特点。方法回顾性分析２０１４年１月至２０１６年１０月北京地坛医院收治的ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者７０例，分别采用真菌培养法、墨汁染色法、隐球菌抗原乳胶凝集法检测隐球菌。结果患者脑脊液外观均为无色透明，不浑浊，常规检测结果无明

艾滋病合并隐球菌性脑膜炎探索 本文内容：

摘要：目的探讨艾滋病（ＡＩＤＳ）合并隐球菌性脑膜炎（ＣＭ）患者脑脊液检测指标的变化特点。方法回顾性分析２０１４年１月至２０１６年１０月北京地坛医院收治的ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者７０例，分别采用真菌培养法、墨汁染色法、隐球菌抗原乳胶凝集法检测隐球菌。结果患者脑脊液外观均为无色透明，不浑浊，常规检测结果无明显变化，其中白细胞计数为（２７．６±３１．９）个／微升，血糖水平为（２．７４±０．６７）ｍｍｏｌ／Ｌ，蛋白水平为（６９．８±５３．９）ｍｇ／Ｌ。外周血中ＣＤ４＋Ｔ细胞计数为（２９．９±２５．３）个／微升，其中５４例＜５０个／微升，１５例为＞５０～＜１００个／微升，１例为１０５个／微升。隐球菌抗原乳胶凝集法的阳性检出率为１００．０％（７０／７０），真菌培养法的阳性检出率为５７．１％（４０／７０），墨汁染色法的阳性检出率为８０．０％（５６／７０）。对真菌培养阳性的４０株隐球菌进行药敏试验，氟胞嘧啶、二性霉素Ｂ、伊曲康唑、伏立康唑敏感３７株，中介３株。临床采用单一或联合的抗真菌药对７０例ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者进行治疗，好转４８例，未愈１５例，死亡７例，病死率为１０％。结论采用墨汁染色法、真菌培养法及隐球菌抗原乳胶凝集法进行联合检测，有助于ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者的早诊断，可大大提高ＣＭ治愈好转率。

关键词：艾滋病；隐球菌；隐球菌性脑膜炎

隐球菌性脑膜炎（ＣＭ）是中枢神经系统真菌感染的常见类型。艾滋病（ＡＩＤＳ）患者机体免疫功能严重缺陷，常可合并各种致命性的机会感染，其中合并ＣＭ较为常见。ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者病情危重，死亡率高。本研究探讨ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者脑脊液检测指标水平变化，为临床提供参考。现报道如下。

１资料与方法

１．１一般资料

选取２０１４年１月至２０１６年１０月首都医科大学附属北京地坛医院收治的７０例ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者作为研究对象，其中男６０例，女１０例，年龄２０～６９岁，平均３９岁。

１．２方法

分别采用真菌培养法、墨汁染色法、隐球菌抗原乳胶凝集法检测脑脊液标本中新型隐球菌属。采集患者脑脊液标本，４００×ｇ离心５ｍｉｎ，将离心后的脑脊液标本接种到沙保罗培养基中，３５℃培养２４～７２ｈ，用ＡＰＩ２０ＣＡＵＸ型真菌鉴定条进行鉴定，同时将沉淀物进行墨汁染色。隐球菌抗原采用美国Ｉｍｍｕｎｏ－Ｍｙｃｏｌｏｇｉｃｓ公司隐球菌抗原乳胶检测试剂盒进行检测。真菌药敏检测采用ＡＴＢＦｕｎｇｕｓ３药敏试剂盒进行定量测定。外周血ＣＤ４＋Ｔ细胞采用ＢＤＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ流式细胞仪进行检测。以上操作严格按照说明书进行。

１．３统计学处理

采用ＳＰＳＳ１６．０软件对数据进行统计分析；计量资料以ｘ±ｓ表示；计数资料采用百分数或率表示，组间比较采用χ２检验；以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

２结果

２．１脑脊液与ＣＤ４＋Ｔ细胞检测结果比较

患者脑脊液外观均为无色透明，不浑浊，常规检测结果无明显变化，其中白细胞计数为（２７．６±３１．９）个／微升，血糖水平为（２．７４±０．６７）ｍｍｏｌ／Ｌ，蛋白水平为（６９．８±５３．９）ｍｇ／Ｌ。外周血中ＣＤ４＋Ｔ细胞计数为（２９．９±２５．３）个／微升，其中５４例＜５０个／微升，１５例为＞５０～＜１００个／微升，１例为１０５个／微升。

２．２ＣＭ检测结果比较

隐球菌抗原乳胶凝集法的阳性检出率为１００．００％（７０／７０），真菌培养法的阳性检出率为５７．１％（４０／７０），墨汁染色法的阳性检出率为８０．０％（５６／７０）。

２．３药敏结果及治疗情况

对真菌培养阳性的４０株隐球菌进行药敏试验，氟胞嘧啶、二性霉素Ｂ、伊曲康唑、伏立康唑敏感３７株，中介３株。临床采用单一或联合的抗真菌药对７０例ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者进行治疗，好转４８例，未愈１５例，死亡７例，病死率为１０％。

３讨论

免疫力低下的患者如ＡＩＤＳ患者，特别是晚期ＡＩＤＳ患者易合并ＣＭ。ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者发病时会出现发热、头痛、神志不清、意识障碍等临床症状，若不及时治疗，患者病死率非常高。在发达国家，ＡＩＤＳ合并ＣＭ病死率为１０％～２５％，在资源有限的地区病死率高达４３％［１］。根据２０１０年美国感染病学会最新的隐球菌病处理临床指南，ＣＭ如能早期诊断，合理治疗，大部分患者是可以治愈的［２］。本研究结果显示，确诊为ＣＭ的７０例ＡＩＤＳ患者中，经临床采用单一或联合抗真菌药物治疗后，好转４８例，未愈１５例，死亡７例，病死率为１０％。本研究结果显示，患者脑脊液外观无色透明，白细胞计数为（２７．６±３１．９）个／微升，无明显增高，与一般细菌性脑膜炎计数不同，应引起高度重视［３－４］；血糖水平为（２．７４±０．６７）ｍｍｏｌ／Ｌ，明显减低；蛋白水平为（６９．８±５３．９）ｍｇ／Ｌ，呈轻度增高。脑脊液常规检测特异性不高，与其他颅内感染性疾病，尤其是结核性脑膜炎难以鉴别［５］。ＣＭ经治疗后，隐球菌菌量减少，并出现一种退变，有透明的荚膜。但荚膜较窄，菌体反而增大，中心折光物质在高倍镜下不易看清，有时难以辨认，容易漏诊。本研究中，墨汁染色法阳性检出率为８０．０％，与以往报道的墨汁染色法的敏感性相一致［６］。隐球菌抗真菌治疗后活性减低，很难再培养出。本研究中，真菌培养阳性检出率只有５７．１％（４０／７０），可能是因为患者来自全国各地，其中部分患者已经在当地接受了长时间的抗真菌药物，隐球菌的活性已经明显减低，所以，难以培养出来。隐球菌对棘白菌素类药物天然耐药。目前，被公认的可用于治疗隐球菌的药物为二性霉素Ｂ、５－氟胞嘧啶和氟康唑［７］。本组研究中，隐球菌对氟胞嘧啶、二性霉素Ｂ、伊曲康唑、伏立康唑敏均敏感。尽管有多种抗真菌药物可用于ＣＭ的治疗，但仍存在诸多挑战，如二性霉素Ｂ的不良反应多，疗程长，易复发及复燃等问题，而且在治疗过程中可能发生耐药或敏感性降低等［８］。新型隐球菌抗原的检测非常重要，对于早期诊断ＣＭ有重要价值［９－１１］，临床上一部分患者在就诊初期未能及时得到病原学证据，成为本病容易漏诊的最常见原因。如巴西副球孢子菌的抗原浓度＞０．１ｍｇ／ｍＬ时存在交叉反应，会造成假阳性，也有文献报道，毛孢子菌和结核分枝杆菌感染也会出现假阳性［１２］。目前，国外已用隐球菌抗原乳胶凝集法代替一般的墨汁染色法，明显提高了诊断的灵敏度和特异度，均可以达到９０％以上。隐球菌抗原的检测不受送检标本中菌体数量的限制，亦不受药物治疗的影响，可作为活性感染的证据。隐球菌抗原滴度的改变对于临床治疗疗效的观察非常重要［１３］。ＡＩＤＳ患者由于细胞免疫功能下降，发生侵袭性真菌感染的危险性明显增加，且发病率与患者的ＣＤ４＋Ｔ细胞计数水平密切相关。本研究中，６９例ＣＭ患者ＣＤ４＋Ｔ细胞计数＜１００个／微升，其中５４例ＣＤ４＋Ｔ细胞计数＜５０个／微升。ＣＤ４＋Ｔ细胞计数越低表明机体的免疫功能已经严重受损，此时极易合并ＣＭ［１４］。综上所述，对于ＡＩＤＳ合并ＣＭ患者，为了避免受病程长短、菌量多少、个体差异、用药与否的影响，应联合采用墨汁染色法、真菌培养法及隐球菌抗原乳胶凝集法进行检，综合分析、及早诊断、针对治疗、合理用药，提高ＣＭ治愈好转率。

作者：孙继云 唐会云 徐新民 王慧珠 单位：首都医科大学附属北京地坛医院检验科 晋城市第三人民医院检验科

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