篇一：三千字论文
文本解读：观念和方法
引言
上好一节课有三个关键：1.正确深入的文本解读；2.独具匠心的教学设计；3.机动灵活的教学实施。
文本解读现存的问题——
如《纪昌学射》告诉我们什么道理？请看：
全班学生人数 27人 100 %
学习要谦虚 2人 7．4%
学习要刻苦 13人48．1%
学习要练基本功9人 33．3%
学习要刻苦要练基本功3人 11．1%
资料来源：杭州市长寿桥小学四﹙3﹚班（借班）
2008年3月28
道理应该是要苦练基本功。问题出在哪里？应该要考虑：
1．《纪昌学射》这个故事“意料之外又在情理之中”的地方是什么？2．这篇课文中哪些东西是学生自己能学懂的？哪些东西是容易被学生忽略的？
文本解读是读者通过阅读从文学文本中获取和解释意义的过程。文学文本的语言具有模糊性，优秀的文本内涵含蓄而丰富，这就使得文学文本的意义具有不确定性。不同的时代、不同的读者阅读同一个文本，会读出不同的意义。
一 放松心态
慢慢走，欣赏啊﹗——朱光潜：《谈美》
让我们暂时忘却教师的身份、教学的任务，以一个普通读者的放松心态来欣赏作品，获得自然的阅读体验和真实的审美直觉。这是一种非功利的阅读，是一种以感性为主的阅读。这种阅读是文学作品教学的前提和基础。（摘自《小学语文教师》2008年第3期沈大安文）
二 潜心会文
故说诗者，不以文害辞，不以辞害意，以意逆志，是为得之。
《孟子·万章上》
诗，指《诗经》。古人读书目的为“以意逆志”。
陶不求甚解，疏狂不可循。甚解岂难致，潜心会本文。
作者思有路，遵路识斯真。作者胸有境，入境始与亲。
一字未宜忽，语语悟其神。惟文通彼此，譬如梁与津。
叶圣陶《语文教学二十韵》
解读《卖火柴的小女孩》中的一段：
她的一双小手几乎冻僵了。啊，哪怕一根小小的火柴，对她也是有好处的！她敢从成把的火柴里抽出一根， 在墙上擦燃了，来暖和暖和自己的小手吗？她终于抽出了一根。哧！火柴燃起来了，冒出火焰来了！她把小手拢在火焰上。多么温暖多么明亮的火焰啊，简直像一枝小小的蜡烛！
其中“敢”、“终于”、“多么”、“多么”都值得探究。
《渔歌子》[唐] 张志和
西塞山前白鹭飞，
桃花流水鳜鱼肥。
青箬笠，绿蓑衣，
斜风细雨不须归。
这首词中哪几个字“不宜忽”？
（第一次专家与教师互动开始，老师们积极发表自己的看法，有的说“肥”，表现了作者安逸满足的生活心态；有的说全诗中写颜色的词；有的说“不须归”。但都没有提到沈老师所关注的“青”和“绿”，原本箬笠和蓑衣都应该是泛黄了呀。）
三 知人论世
这也是孟子的文本解读思想。
解读文本也不必一味靠自己冥思苦想，查阅必要的资料可以帮助我们更好地理解作品。作家生平介绍、写作时代背景、作家的其他作品、作家创作意图的阐述，以及前人对这部作品的评论，无一不是我们打开文本大门的钥匙。
江 雪 [唐] 柳宗元
千山鸟飞绝，
万径人踪灭。
孤舟蓑笠翁，
独钓寒江雪。
郑雪琴老师上课时“后发制人”，让学生先说说老翁为什么“独钓寒江雪”？当学生有各种猜测时，教师出示了诗人的生平简介，明白了，是表现诗人不愿意同
流合污的清高。而不是学生所猜的“郁闷说”、“兴趣说”、“寻找清静说”等。
四 寻找缝隙
“文本细读”是二十世纪三四十年代英美“新批评”的口号。这个流派强调文本
是一个独立的存在，要求读者寻找文本中的矛盾与缝隙，从而发现作品的意义。面朝大海，春暖花开
海 子
从明天起，做一个幸福的人
喂马，劈柴，周游世界
从明天起，关心粮食和蔬菜
我有一所房子，面朝大海，春暖花开
从明天起，和每一个亲人通信
告诉他们我的幸福
那幸福的闪电告诉我的
我将告诉每一个人
给每一条河每一座山取一个温暖的名字
陌生人，我也为你祝福
愿你有一个灿烂的前程
愿你有情人终成眷属
愿你在尘世获得幸福
我只愿面朝大海，春暖花开
（沈老师请刚才第一位发言的安吉路实验学校毛信民老师朗读这首诗，毛信民说他未读到过，但他朗诵地深情并茂，博得了大家的掌声，还说了自己比较准确的感受：善良的诗人希望人们都幸福。）
你从这首诗中发现了哪些矛盾或者漏洞？
（第二次互动开始，可能有了第一次的经验，这一次，老师们发言更加踊跃了，找到了文本中许多矛盾处，品出了诗作可能是诗人告别世界的宣言。）
这首诗写于1989年1月13日。1989年3月26日海子在山海关卧轨自杀。
他应当一边读，一边回想他所经验的相似的人生，或者一边读，一边到现实的活人中去看。
——茅 盾
黄鹤楼送孟浩然之广陵 [唐] 李白
故人西辞黄鹤楼，烟花三月下扬州。
孤帆远影碧空尽，唯见长江天际流。
“孤帆”是孤零零的一条船吗？这儿就有一种“过尽千帆都不是”的感觉。
他一句一句地审阅，看完一句就用铅笔在那一句后面画上一个小圆圈。他不是普通地浏览，而是一边看一边思索，有时停笔想一想，有时问我一两句。 ——《一夜的工作》
我们往往用演绎法来上，抓住“劳苦”、“艰辛”来展开研读。然而，文本需要我们一点一点地读，才能读出很多，如：看完一句就用铅笔在那一句后面画上一个小圆圈。其实，这儿很多学生的理解是不准确的，他们有的认为是周总理年纪大记性差怕忘记??如果一点一点读，会读出很多东西，而不仅仅是艰辛和劳苦，还有周恩来总理的谨小慎微、举轻若重、鞠躬尽瘁等。
五 多元解读
《红楼梦》是中国许多人都知道的，至少，是知道这名目的书。谁是作者和续作者姑且勿论，单是命意，就因读者的眼光而有种种：经学家看见《易》，道学家看见淫，才子看见缠绵，革命家看见排满，流言家看见宫闱秘事??——鲁 迅
二十世纪六七十年代，“接受美学 ”在德国崛起，并迅速风靡世界。这个流派认为，文学作品的意义并不只是作者创造的，而是作者的创作和读者的接受共同作用的结果，因此作品的意义也不是“客观”和固定的。
我们所说的文学作品的“意义”，实际上包含了三个层面：一是作者意义，即作者欲在作品中表达的主观意图；二是文本意义，即作者在实际作品中通过语言词句呈现出来的意义；三是读者意义，即读者通过阅读所领悟到的意义。这三个层面的意义既互相依存，又有差异。
（安吉路实验学校曹爱卫老师上台朗读了《去年的树》，读出了自己的感受）《去年的树》作者的本意可能是什么？
（第三次互动开始，大家揣摩这位日本童话作家新美南吉的创作意图：歌颂友情；表现承诺和诚信；宣传环境保护等。）
思考之一：我们能不能还原作者的本意？思考之二：我们有没有必要还原作者的本意？
（第四次互动应该是比较精彩的，因为老师们的观点会不同。有的老师很肯定地回答：不能还原；有的老师觉得需要并可以一点点还原。因为时间关系，沈老师没有让讨论再继续）
德国哲学家伽达默尔指出：文本作者的意图是当代人不可能“客观”地完全再现的，文本的“原义”也是不可能完全恢复的。读者和作者之间的“时间间距”是不可能克服的，也是不应当克服的。理解是从文本中接受有意义的东西，并把它们“解释”成自己理解世界的方式。
一切阅读都是误读。
——〔美〕哈罗德·布鲁姆
我们是否该读出我有用的东西。就像于丹的《论语心得》一样。
张伟对《再见了，亲人》的当代解读
谁是亲人？
朝鲜人民是志愿军的亲人
志愿军也是朝鲜人民的亲人
和平时期有没有亲人？
只要人人拥有爱心，处处都有亲人
“她想给自己暖和一下??”人们说。谁也不知道：她曾经看到过那些美丽的东西，她曾经多么幸福地跟着她的奶奶走向新年的幸福中。
——安徒生：《卖火柴的小女孩》
对于“幸福”在新时代的解读。
文本解读的历史比较
时 期流派或代表人物方 法中心 中国古代孟 子以意逆志，知人论世作者 中国现代叶圣陶潜心会文，推敲词句
二十世纪二三十年代英美“新批评”细读文本文本 二十世纪六七十年代接受美学多元解读读者 抓住主导倾向 把握教育价值
如《三打白骨精》：你喜欢这个故事中的哪一个人物?学生回答喜欢白骨精，因为她孝顺。对于这种不是主流社会价值观的另类思维，我们要正确把握。如《去年的树》，人文内涵中最有价值的是什么?
生与死是一道不能逾越的界线，《去年的树》中鸟和树的友情却超越了这道界线。生死不渝的友谊是一种感人肺腑的永恒情怀。新美南吉在一个看似波澜不惊的故事后面，蕴藏着对生命和友谊的深刻感悟。
——沈大安
《去年的树》的另一些解读：
A 树用“他”，鸟用“她”，作者是在向我们讲述一个关于爱情的故事吗?
B 世事多变，人生无常，谁也不知道明天会发生什么。
C 既然践约是如此困难，当初就不该轻易承诺。
六 换位思考
毕竟，教师读文本是为教学服务的，所以我们在阅读文本时必不可少的一步是换位思考：如果让孩子们来读这个文本，他们会怎样解读？他们有哪些不懂的地方？他们会提出什么问题？他们会误读吗？??
《三个儿子》抓结尾问“为什么老爷爷只看到一个儿子呢？”二年级小朋友会怎么回答呢？
有的回答老爷爷年纪大看不清了，老师继续问：他看到的是哪个儿子？学生回答是那个翻跟头的儿子，还说从插图中看出来。
让孩子早熟，绝对不是一件好事，“深度语文”我不赞成。我们的语文教学要“深入浅出”。
《泊船瓜洲》对于“春风又绿江南岸”的深掘，如踌躇满志或是忧心忡忡等都不合适，只到思乡之情的理解即可。
《珍珠鸟》结尾让学生讨论“珍珠鸟究竟有没有自由”远离文本。《清平乐 村居》谈到“居安思危”或“居危思安”都太牵强。
尽管教师对文本的解读可以非常深刻和独到，但我们时刻不能忘记我们面对的是6—12岁的儿童。他们有自己认识世界的方式。我们不能把成人的认识强加给孩子，或牵引着他们向前。好的教学贵在深入浅出，符合儿童的认识水平。《一夜的工作》设计思路
看周总理怎样审阅一个文件
看周总理怎样审阅一夜文件
看周总理一天的工作﹙1974年3月26日﹚
结语：
我们走过了“普通读者—教师—学生”的文本解读心路历程——
摆脱功利目的, 自由欣赏作品;
细读文本, 潜心会文, 既把握文本的主要倾向, 也读出自己的独到感受; 充分考虑儿童学习的困难, 深入浅出地帮助学生阅读文本。
篇二：中国梦论文_三千字
作文我的中国梦
当中国梦在遥远的北京被唤醒时，全国人名都热情洋溢地为此奔走，因为它的存在，我们有了一个共同的目标，要实现整个名族伟大复兴，经济高度繁荣，科技快速发展，军事力量日益强大，人民生活水平高度提高，让世界看到，中国正在一天天地登上世界的各个舞台，发挥着原来越重要的角色，在以后的很多地方都离不开这样的一个国家。在很久以前的唐朝，唐人就已经在各个领域做得很出色，无论是军事，科技还是文化，他们都是出类拔萃的，不如说四大发明就来自于那个时候。而我们今天所提出的中国梦已不再局限于那样的一个程度，已经超越只满足民生所需、减少战乱，而是要让全国人名在满足基本物质需求的同时，更多地满足其精神方面的需要。
习近平总书记将中国梦阐释为两个百年奋斗目标，对中国梦的实现进行了里程碑式的规划。“我坚信，到中国共产党成立100年时全面建成小康社会的目标一定能实现，到新中国成立100年时建成富强、民主、文明、和谐的社会主义现代化国家的目标一定能实现。”这一伟大梦想的实现与我们的人民、我们的政府、我们的执政党息息相关。
总书记说：“中国梦，就是要实现中华名族的伟大复兴”。一般
来说，理想越是远大，要实现的过程就无比艰辛，，虽然说发展改革的时机到了，时间也会比较的长。而作为我们个人，就是要汇小流以成江海，凝聚个人力量。首先，我们要相信党的领导，对国家绝对忠诚，这是最基本的要求，也只有这样，我们才不会像一盘散沙，而是像一个有无数沙子组成的混凝土一样坚强，怀有共同的目标，怀有一样的理想，真真实实的做好自己应该做的点点滴滴，不违背祖国，不辜负党的期望；第二，要普及社会主义价值理论体系，要把建成中国特色社会主义社会这一想法让全中国人民都知道，因为我们不是一个人或一群人，我们是一个国家，我们也不可能由一个人或一群人来完成，我们需要动员全体所有社会人一起来规划建造我们自己的家园，如果思想得不到提高，行动上就永远跟不上节奏，活着就像一个迷路的孩子，知道要走出去，可就是迷失了方向；第三，社会主义领导层要不断打开视野，积极寻找治国之策，因为一个国家的各个方面的发展繁荣，有很大程度上考验着我们政府的策略，尤其是现在的这个阶段，我们的成果已经得到一定的认可，但和世界发达国家仍有一定的距离，只有我们的领导者能够既能保持一些方面的持续发展，又能放眼看世界，向欧美等归家吸取先进的治国治家之策，才能保持天下太平，经济繁荣，经济卫生等各领域不落后。
可以这样说，中国梦的理想是完全可以实现的，而且它也是切实可行的。看着忙忙碌碌的身影，我不禁想到了作为未来教师的我们似乎该做些什么，古人云：“百年大计，教育为本。”而最近
的国家政策也在大力扶持教育，包括免费师范生政策，鼓励大学生去乡村任教等等，种种迹象表明教育已经迎来了发展的大好时机，正如以前的可持续发展一样，我们的发展也要保证其有一定的续航能力，这就考验的是一代又一代的青年才俊，而这样的青年才俊的素质很大程度上取决于教育的质量，由此我不禁感受我们身上的包袱，是我们这一代表现的时候了，因为我们即将走向职场，走向社会。
选择教师，不仅是选择事业与榜样，更是选择继承与未来，中国不可能没有教师的存在，而我们也正是肩负着这样的历史使命和责任，毅然决然的要在路上不断的前行。我国目前的教育状况还很令人担忧，中国现在仍然是世界上人口最多的国家，我们每年都有很多学生因为各种原因而辍学，有的是因为贫穷落后而上不起学，有的是因为现行的教育体制而不得不半途而废，比如说好多地方不能参加异地高考，还有的是因为考不上而与教育绝缘等等，前不久，民进中央关于农村初中辍学状况的一份调查显示，目前农村初中平均辍学率接近40%，有的地区农村孩子的辍学率更高，达到近90%，严重影响农村教育的发展和农民素质的提高。，在谈到农村孩子辍学率上升的两个原因时，有两点是值得参考的：一是政府的9年义务教育制度没有落到实处，二是教育投入不合理、对城市的教育投资明显高于农村。但除此之外，，政府对公民进行的有关法制教育不够，是导孩子辍学率上升的第三个原因。可以这样说，我国的教育普片存在瑕疵，重点
是农村，根本在于政策的制定和落实，试想，“九年义务教育”被提出来了，而为什么还有那么多人没能上学，为什么我们就只能九年义务呢，假若我们的高中生也免费就读，大学生也给予一定的补贴，我们的教育还会保持在这种状态吗？
我国对教育的改革是尝试过很长一段时间的努力的，2001年，国务院就已经开始试点实行九年义务教育体制，2006年就已经基本实现全覆盖了，包括西部农村地区，实现了“人民教育人民办”到“人民教育政府办”的转变，以前曾流行这样一句话“读完初中，外出打工”，而现在则是“读完初中读职中，样样精通”。可见教育对于一个青年人的分量是举足轻重的，想想以前的一辈，靠扫文盲来让广大人民群众认识几个字，而现在的我们则对数学、化学、物理等各个领域都小有见解，尽管不可能人人都达到精通的地步，但比起我们的上一代，我们懂得更多。总之，教育对于个人是非常重要的。一个人，离开了教育，就会退回到很久以前的那种思想状态和行为方式，就像一个与世隔绝的野人，无法在社会上生。一个国家救更不能缺少教育，美国前总统尼克松曾经说过，“当一个国家失去了她的文化之后，我们便可以侵略它”，而没有教育，就没有了一切，包括文化、军事科技。
作为一个当代大学生，我对教育也是有一些自己的看法的。教育是一个国家最重要的组成部分之一，很多国家都把优先发展教育作为一项基本的治国策略。第一，改革要治根治本，不能空喊口号，我们的很多想法被提出来之后，被炒得红红火火，而一
段时间后却被抛诸脑后，就像以前的学生减压减负，当中国教育部提出来的时候，全国各地一拥而上，呼吁减负，但在后续的进程中，“吊瓶班”、“赤膊班”出现了，学校变相补课，学生家长盲目给孩子找补习班，结果多么好的想法还是付之东流，有想法还得严格的操作实践；第二，要改变我们的教育观念，这在很大程度上能为第一条奠定很大的基础，很多情况的出现，跟一个人或一群人的思想是离不开的，一旦你有某种想法，你的行为就会被你的思想所控制，以成绩论英雄，在校园里基本是一个谁也再清楚不过的金科玉律，你的成绩好，你就能得到老师的表扬，学生的赞叹，家长的厚爱，但如果情况相反，你就会像一个被丢弃的婴儿，无数家长和孩子也正是为了能得高分而不惜一切手段，其结果是孩子的某些天性和创造力被扼杀了，这正如我国现在人才匮乏，其实和这也是有一定关系的，因此，改变观念是很重要的，要让全国人民都要与时俱进；第三，总结经验创新发展，我们已经建国六十多周年，可以说国内国外的很多道理和方法我们都已经考察探索过，有的已经应用于现实教育中，有的也被摒弃了，而且现在也是一个信息化的时代，世界的各个角落基本达到信息共享，而我们现在要做的就是在全球人类实践的经验之上，积极探索新的可行之道，也只有这样，才能真正找到与国情相适应的最好方法，仅通过学习而不创造是很难取得新进展的。
今天的中国，正在科学发展的航道上走向新辉煌；今天的中国教育，正在建设人力资源强国。国家的发展需要教育，教育的
篇三：3000字论文摘要范本
交联于蛋膜上的纳米颗粒增强的尿酸酶传感器
陈燕花
化工与资源环境学院 化学工程与工艺专业
指导教师：伍 林
1前言
随着生命科学的发展进入分子水平，有人预言21世纪将是检验医学的世纪，即从分子水平对疾病进行诊断和治疗。这就要求临床生物化学检验准确、快速、简便、标本微量化、方法标准化、且经济实用。生物传感器正是在此要求下出现的一类跨领域、多学科的前沿诊断仪器。
国内外对生物传感器展开了广泛深入地研究，已经研制出了葡萄糖生物传感器、乳糖生物传感器、尿酸酶生物传感器、DNA生物传感器、BOD生物传感器、测酚生物传感器等多种类别的生物传感器，来满足人们在临床检验、环境监测和生化分析[1-3]等领域中的需求。
本实验将纳米二氧化硅凝胶和尿酸酶紧贴于蛋膜上，将酶膜紧贴于普鲁士蓝（PB）修饰的玻碳电极表面，然后以自制铂片电极为对电极、甘汞电极为参比电极，组成三电极体系，制成尿酸酶生物传感器。当体液中的尿酸通过酶膜时，与酶进行反应，检测出该处产生的反应电流，然后将其换算成尿酸浓度加以显示。应用尿酸酶传感器测定人体血和尿中尿酸的浓度，是一种准确、快速、简便的方法，可帮助诊断肾炎、白血病和肿瘤等疾病。
2 尿酸酶生物传感器的工作原理
尿酸酶生物传感器的工作原理是：尿酸在尿酸酶作用下，被分子氧氧化成尿囊素，并产生二氧化碳和过氧化氢。根据反应前后氧的消耗，我们用电极监测溶液中氧的变化，就可推算出尿酸的浓度，其工作机理如图2：
[4]
图1尿酸在尿酸酶作用下的反应机理
Figure1 Principle of uric acid under the uricase
3实验部分
3.1 仪器与试剂
试剂：尿酸酶（4.6units/mg， Sigma公司），牛血清白蛋白（BR），戊二醛（CP），磷酸氢二钠，磷酸二
氢钾（AR），氯化钠(AR)，鸡蛋，气透膜，实验用水为二次蒸馏水。
仪器：玻碳电极（天津兰力天仪器有限公司），铂电极（自制，铂片长×宽×厚为5×4×0.25mm），甘汞
电极（上海雷磁），CHI600型电化学工作站(上海辰华仪器有限公司)。
3.2 尿酸酶电极的制备
取新鲜鸡蛋壳小心剥离蛋膜，依次用NaCl溶液、蒸馏水清洗；称取12.5mg牛血清白蛋白（BSA）溶于250μL 10g?L尿酸酶溶液中；将蛋膜铺于洁净的玻片上，小心裁取直径为1cm的圆形膜；在膜上依次滴加25μL尿酸酶-牛血清白蛋白混合溶液、改性纳米二氧化硅凝胶液、5μL 2%戊二醛溶液，室温放置3~4h，置4℃冰箱冷藏过夜；过夜后的蛋膜用磷酸缓冲液(PBS)漂洗数次；将酶膜紧贴于PB修饰的玻碳电极表面，覆盖气透膜，即制成尿酸酶电极[5,6]。
实验流程如图2所示。
-1
图2 纳米颗粒增强的尿酸酶电极制作示意图
Figure2 Manufacture flow chart of nanoparticles strengthen uricase electrode
3.3 实验方法
采用三电极体系进行检测：饱和甘汞电极为参比电极，制作的尿酸酶电极为工作电极，自制铂片电极为对电极，底液为0.1mol ·L-1的KCl 磷酸盐缓冲溶液，在一定的温度下进行检测。测量时，先将三
电极置于缓冲溶液中，加一电压于工作电极(0.4ＶvsSCE)，当背景电流值减小至一恒定值时，将电极放至被测尿酸溶液中，分别记录不同时间的电流响应值，扣除初始背景电流值，即为被测尿酸离子浓度的电极电流响应值。
4影响因素分析
4.1 尿酸浓度的影响
测量不同浓度尿酸的响应信号，使得电极响应与尿酸浓度成很好的线性关系，酶电极在不同浓度的尿酸中的循环伏安如图3所示。确定尿酸酶生物传感器检测尿酸浓度的线性响应范围，如图4 所示。实验测定尿酸浓度的线性响应范围为7.5×10~1.5×10mol·L。
-6-4-1
图3酶电极在不同浓度的尿酸中的循环伏安图 图4尿酸浓度与响应电流线性关系图 Fig3 Cyclic voltammograms of the uricase biosensorFig4 Linear relationship’ chart of difference of urate standard in different concentration of uric acid current response solutions on the urate biosensor
(a.112.5μg/mL, b.75μg/mL, c.37.5μg/mL, d.7.5μg/mL, e.0μg/mL)
4.2 尿酸酶浓度的影响
向尿酸溶液中多次加入尿酸酶，以测定不同浓度尿酸酶对氧化峰电流的影响。电流响应随着尿酸酶浓度从零到某浓度的增加而增加。综合考虑电流响应和经济因素，选择最适宜的尿酸酶浓度1.5U。
4.3 纳米二氧化硅的影响
酶电极的性能是由酶的催化活性、酶活性中心和导电基质之间电子交换速率决定的。纳米颗粒比表面积大、表面自由能高，吸附能力较强，把纳米颗粒引人到传感器研究中，可以使更多的酶分子可以固定在纳米颗粒表面。另外，由于纳米颗粒尺寸很小，有可能与酶内部的FAD亲水基团发生作用，从而引起酶构型上的变化。这种变化使得酶的活性中心FAD更接近底物，提高了酶的催化效率。改性纳米SiO2颗粒对生物分子具有很好的选择吸附性，可望实现纳米颗粒与酶分子活性中心及电极之间的直接电化学作用，大大增强生物传感器的灵敏度。本实验对不添加纳米二氧化硅、添加纳米二氧化硅、添加改性的纳米二氧化硅，所制备的尿酸酶生物传感器进行了比较，实验证明纳米二氧化硅有增强电流响应信号的作用。
4.4 缓冲溶液pH值的影响
缓冲溶液pH值对酶催化反应速率和酶的活性有较大影响，如图5所示。尿酸酶最适宜pH范围较宽。综合考虑酶的活性以及响应电流的最大的灵敏度，选择最适宜的pH值6.5。
图5 pH值对酶生物传感器响应信号的影响 图6 温度对酶生物传感器响应信号的影响 Fig5 Effect of pH on the current responseFig6 Cyclic voltammograms of the uricase biosensor
of the enzyne biosensorin different temperature
(a.25℃, b.20℃, c.30℃, d.35℃, e.10℃)
4.5 温度的影响
温度的变化将影响酶的活性及酶催化反应速率。在10~35℃范围内考察氧化峰电流与温度的关系，如上图图6所示。氧化峰电流随温度的升高而增大。考虑温度较高时酶易变性失活，选择最适宜的温度25℃。
4.6 工作电极的影响
将酶膜分别固定在铂电极、玻碳电极、石墨电极上，观察响应电流的灵敏度，选择最适宜的固定电极-玻碳电极进行实验。
5结论
本方法研制的尿酸酶生物传感器具有操作简单、分析速度快、灵敏度高、所需试样少的特点，通过进一步研究后，有望应用于临床，帮助诊断肾炎、白血病和肿瘤等疾病。
参 考 文 献
[1] 潘涛. 生物传感器的概述和研究进展[J]. 江苏广播电视大学学报, 2002, 6(12): 55-56.
[2] Mukhopadhya K, Phadtare S, Vinod V P, et al. Gold nanoparticles assembled on amine-functionalized Na-γzeolite: A biocompatible surface for enzyme immobilization[J]. Langmurir, 2003, 19: 3858-3863.
[3] Sbrana F, Parodim T, Ricci D, et al. Langmurir films of thiolated gold nanoparticles transferred onto functionalized substrate: 2-D local organization[J]. Material Science and engineering C, 2002, 22: 187-191.
[4] 铃木周一. 生物传感器[M]. 科学出版社, 1988.
[5] 邓健, 廖力夫, 袁亚莉, 等. 乳酸氧化酶共价交联于蛋膜上制备乳酸传感器[J]. 分析试验室, 2002, 21(6): 64-66.
[6] 邓健, 袁亚莉, 许金生, 等. 葡萄糖氧化酶共价交联于蛋膜上的葡萄糖传感器[J]. 分析化学, 1998, 26(10): 1257-1259.
Nanoparticles Strengthen Uricase Biosensor Utilizing
Covalently Bond on Egg Membrane
Chen Yan-hua
College of Chemical Engineering, Resources and Environment
Wuhan University of Science and Technology
Abstract: In the experiment, BSA(bovine serum albumin) and glutaraldehyde were taked as cross linking reagent, and nanoparticles gel and uricase were cross-linked on egg membrane. The three electrode system which composed of two platinums electrodes act as working electrode and counter electrode respectively, saturated calomel electrode acts as reference electrode, and execut uricase biosensor. The concentration of uricase, nanoparticles, pH value of solution, temperature were studied emphatically. The 1.5U uricase in pH6.5 solution at the temperature 25℃ were appropriate conditions. The linear range of the biosensor is
7.5×10-6~1.12.5×10-4μg/mL.
Keywords: uricase; egg membrane; nanoparticles; biosensor
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