篇一：3000字论文摘要范本
交联于蛋膜上的纳米颗粒增强的尿酸酶传感器
陈燕花
化工与资源环境学院 化学工程与工艺专业
指导教师：伍 林
1前言
随着生命科学的发展进入分子水平，有人预言21世纪将是检验医学的世纪，即从分子水平对疾病进行诊断和治疗。这就要求临床生物化学检验准确、快速、简便、标本微量化、方法标准化、且经济实用。生物传感器正是在此要求下出现的一类跨领域、多学科的前沿诊断仪器。
国内外对生物传感器展开了广泛深入地研究，已经研制出了葡萄糖生物传感器、乳糖生物传感器、尿酸酶生物传感器、DNA生物传感器、BOD生物传感器、测酚生物传感器等多种类别的生物传感器，来满足人们在临床检验、环境监测和生化分析[1-3]等领域中的需求。
本实验将纳米二氧化硅凝胶和尿酸酶紧贴于蛋膜上，将酶膜紧贴于普鲁士蓝（PB）修饰的玻碳电极表面，然后以自制铂片电极为对电极、甘汞电极为参比电极，组成三电极体系，制成尿酸酶生物传感器。当体液中的尿酸通过酶膜时，与酶进行反应，检测出该处产生的反应电流，然后将其换算成尿酸浓度加以显示。应用尿酸酶传感器测定人体血和尿中尿酸的浓度，是一种准确、快速、简便的方法，可帮助诊断肾炎、白血病和肿瘤等疾病。
2 尿酸酶生物传感器的工作原理
尿酸酶生物传感器的工作原理是：尿酸在尿酸酶作用下，被分子氧氧化成尿囊素，并产生二氧化碳和过氧化氢。根据反应前后氧的消耗，我们用电极监测溶液中氧的变化，就可推算出尿酸的浓度，其工作机理如图2：
[4]
图1尿酸在尿酸酶作用下的反应机理
Figure1 Principle of uric acid under the uricase
3实验部分
3.1 仪器与试剂
试剂：尿酸酶（4.6units/mg， Sigma公司），牛血清白蛋白（BR），戊二醛（CP），磷酸氢二钠，磷酸二
氢钾（AR），氯化钠(AR)，鸡蛋，气透膜，实验用水为二次蒸馏水。
仪器：玻碳电极（天津兰力天仪器有限公司），铂电极（自制，铂片长×宽×厚为5×4×0.25mm），甘汞
电极（上海雷磁），CHI600型电化学工作站(上海辰华仪器有限公司)。
3.2 尿酸酶电极的制备
取新鲜鸡蛋壳小心剥离蛋膜，依次用NaCl溶液、蒸馏水清洗；称取12.5mg牛血清白蛋白（BSA）溶于250μL 10g?L尿酸酶溶液中；将蛋膜铺于洁净的玻片上，小心裁取直径为1cm的圆形膜；在膜上依次滴加25μL尿酸酶-牛血清白蛋白混合溶液、改性纳米二氧化硅凝胶液、5μL 2%戊二醛溶液，室温放置3~4h，置4℃冰箱冷藏过夜；过夜后的蛋膜用磷酸缓冲液(PBS)漂洗数次；将酶膜紧贴于PB修饰的玻碳电极表面，覆盖气透膜，即制成尿酸酶电极[5,6]。
实验流程如图2所示。
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图2 纳米颗粒增强的尿酸酶电极制作示意图
Figure2 Manufacture flow chart of nanoparticles strengthen uricase electrode
3.3 实验方法
采用三电极体系进行检测：饱和甘汞电极为参比电极，制作的尿酸酶电极为工作电极，自制铂片电极为对电极，底液为0.1mol ·L-1的KCl 磷酸盐缓冲溶液，在一定的温度下进行检测。测量时，先将三
电极置于缓冲溶液中，加一电压于工作电极(0.4ＶvsSCE)，当背景电流值减小至一恒定值时，将电极放至被测尿酸溶液中，分别记录不同时间的电流响应值，扣除初始背景电流值，即为被测尿酸离子浓度的电极电流响应值。
4影响因素分析
4.1 尿酸浓度的影响
测量不同浓度尿酸的响应信号，使得电极响应与尿酸浓度成很好的线性关系，酶电极在不同浓度的尿酸中的循环伏安如图3所示。确定尿酸酶生物传感器检测尿酸浓度的线性响应范围，如图4 所示。实验测定尿酸浓度的线性响应范围为7.5×10~1.5×10mol·L。
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图3酶电极在不同浓度的尿酸中的循环伏安图 图4尿酸浓度与响应电流线性关系图 Fig3 Cyclic voltammograms of the uricase biosensorFig4 Linear relationship’ chart of difference of urate standard in different concentration of uric acid current response solutions on the urate biosensor
(a.112.5μg/mL, b.75μg/mL, c.37.5μg/mL, d.7.5μg/mL, e.0μg/mL)
4.2 尿酸酶浓度的影响
向尿酸溶液中多次加入尿酸酶，以测定不同浓度尿酸酶对氧化峰电流的影响。电流响应随着尿酸酶浓度从零到某浓度的增加而增加。综合考虑电流响应和经济因素，选择最适宜的尿酸酶浓度1.5U。
4.3 纳米二氧化硅的影响
酶电极的性能是由酶的催化活性、酶活性中心和导电基质之间电子交换速率决定的。纳米颗粒比表面积大、表面自由能高，吸附能力较强，把纳米颗粒引人到传感器研究中，可以使更多的酶分子可以固定在纳米颗粒表面。另外，由于纳米颗粒尺寸很小，有可能与酶内部的FAD亲水基团发生作用，从而引起酶构型上的变化。这种变化使得酶的活性中心FAD更接近底物，提高了酶的催化效率。改性纳米SiO2颗粒对生物分子具有很好的选择吸附性，可望实现纳米颗粒与酶分子活性中心及电极之间的直接电化学作用，大大增强生物传感器的灵敏度。本实验对不添加纳米二氧化硅、添加纳米二氧化硅、添加改性的纳米二氧化硅，所制备的尿酸酶生物传感器进行了比较，实验证明纳米二氧化硅有增强电流响应信号的作用。
4.4 缓冲溶液pH值的影响
缓冲溶液pH值对酶催化反应速率和酶的活性有较大影响，如图5所示。尿酸酶最适宜pH范围较宽。综合考虑酶的活性以及响应电流的最大的灵敏度，选择最适宜的pH值6.5。
图5 pH值对酶生物传感器响应信号的影响 图6 温度对酶生物传感器响应信号的影响 Fig5 Effect of pH on the current responseFig6 Cyclic voltammograms of the uricase biosensor
of the enzyne biosensorin different temperature
(a.25℃, b.20℃, c.30℃, d.35℃, e.10℃)
4.5 温度的影响
温度的变化将影响酶的活性及酶催化反应速率。在10~35℃范围内考察氧化峰电流与温度的关系，如上图图6所示。氧化峰电流随温度的升高而增大。考虑温度较高时酶易变性失活，选择最适宜的温度25℃。
4.6 工作电极的影响
将酶膜分别固定在铂电极、玻碳电极、石墨电极上，观察响应电流的灵敏度，选择最适宜的固定电极-玻碳电极进行实验。
5结论
本方法研制的尿酸酶生物传感器具有操作简单、分析速度快、灵敏度高、所需试样少的特点，通过进一步研究后，有望应用于临床，帮助诊断肾炎、白血病和肿瘤等疾病。
参 考 文 献
[1] 潘涛. 生物传感器的概述和研究进展[J]. 江苏广播电视大学学报, 2002, 6(12): 55-56.
[2] Mukhopadhya K, Phadtare S, Vinod V P, et al. Gold nanoparticles assembled on amine-functionalized Na-γzeolite: A biocompatible surface for enzyme immobilization[J]. Langmurir, 2003, 19: 3858-3863.
[3] Sbrana F, Parodim T, Ricci D, et al. Langmurir films of thiolated gold nanoparticles transferred onto functionalized substrate: 2-D local organization[J]. Material Science and engineering C, 2002, 22: 187-191.
[4] 铃木周一. 生物传感器[M]. 科学出版社, 1988.
[5] 邓健, 廖力夫, 袁亚莉, 等. 乳酸氧化酶共价交联于蛋膜上制备乳酸传感器[J]. 分析试验室, 2002, 21(6): 64-66.
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Nanoparticles Strengthen Uricase Biosensor Utilizing
Covalently Bond on Egg Membrane
Chen Yan-hua
College of Chemical Engineering, Resources and Environment
Wuhan University of Science and Technology
Abstract: In the experiment, BSA(bovine serum albumin) and glutaraldehyde were taked as cross linking reagent, and nanoparticles gel and uricase were cross-linked on egg membrane. The three electrode system which composed of two platinums electrodes act as working electrode and counter electrode respectively, saturated calomel electrode acts as reference electrode, and execut uricase biosensor. The concentration of uricase, nanoparticles, pH value of solution, temperature were studied emphatically. The 1.5U uricase in pH6.5 solution at the temperature 25℃ were appropriate conditions. The linear range of the biosensor is
7.5×10-6~1.12.5×10-4μg/mL.
Keywords: uricase; egg membrane; nanoparticles; biosensor
篇二：各种论文的论文写作的格式
论文格式
1、论文格式的论文题目：（下附署名）要求准确、简练、醒目、新颖。
2、论文格式的目录
目录是论文中主要段落的简表。（短篇论文不必列目录）
3、论文格式的内容提要：
是文章主要内容的摘录，要求短、精、完整。字数少可几十字，多不超过三百字为宜。
4、论文格式的关键词或主题词
关键词是从论文的题名、提要和正文中选取出来的，是对表述论文的中心内容有实质意义的词汇。关键词是用作计算机系统标引论文内容特征的词语，便于信息系统汇集，以供读者检索。每篇论文一般选取3-8个词汇作为关键词，另起一行，排在“提要”的左下方。
主题词是经过规范化的词，在确定主题词时，要对论文进行主题分析，依照标引和组配规则转换成主题词表中的规范词语。（参见《汉语主题词表》和《世界汉语主题词表》）。
5、论文格式的论文正文：
（1）引言：引言又称前言、序言和导言，用在论文的开头。引言一般要概括地写出作者意图，说明选题的目的和意义, 并指出论文写作的范围。引言要短小精悍、紧扣主题。
〈2）论文正文：正文是论文的主体，正文应包括论点、论据、论证过程和结论。主体部分包括以下内容：
a.提出问题-论点；
b.分析问题-论据和论证；
c.解决问题-论证方法与步骤；
d.结论。
6、论文格式的参考文献
一篇论文的参考文献是将论文在研究和写作中可参考或引证的主要文献资料，列于论文的末尾。参考文献应另起一页，标注方式按《GB7714-87文后参考文献著录规则》进行。
中文：标题--作者--出版物信息（版地、版者、版期）
英文：作者--标题--出版物信息
所列参考文献的要求是：
（1）所列参考文献应是正式出版物，以便读者考证。
（2）所列举的参考文献要标明序号、著作或文章的标题、作者、出版物信息。
论文的规格，也就是论文的标准。这里讲论文的规格或标准，主要是就论文的质量方面而言的。一般说来，一篇论文需要有三千字以上。
明确论文的规格或标准，这对写好论文有着具体的指导作用。写论文，要在题目需要限度内选择运用一些专业基础知识，必须运用得准确。在论文写作过程中，要多动脑筋，认真思索，紧紧围绕论题，运用专业知识，使论文做到持之有故，言之成理，以体现出综合运用所学知识分析和解决问题的能力。论文的特点、要求、规律及写作步骤
一、论文的特点与要求
专业（如法学）论文与一般论文有何不同？
1．论文的观点具有一定的新颖性和创造性；
2．论文的论点及论据应有一定的科学性和合法性；
3．论文的论证过程应富有逻辑性和表现性。
二、论文写作规律 1．论文在写作之前要有一个积累知识和材料的过程 2．应了解和掌握相应的论文论证方法 三、具体写作步骤 （一）选题（写作内容） 1．确定写作内容 （1）根据社会调查确定选题； （2）根据工作性质确定选题； （3）根据个人兴趣确定选题；
（4）根据社会热点确定选题。
2．进一步收集、整理材料
（1）收集方法：书籍、杂志、网页。
（2）整理：针对诸多文章选择重点、难点、热点问题作为写作材料，适当收集有关问题的产生背景（历史沿革）。非重点或者雷同内容可以不去考虑。
3．确立写作题目以及范围
（1）论文的标题是其内容的表现与缩影，代表着论文的核心，整篇文章要围绕着标题展开论述，因此标题本身的选择首先必须简练凝重、含义深远，有标新立异的感觉，让人有想进一步了解的欲望。
（2）主要是毕业论文字数在6000——8000字。因此题目不宜太大，也不应该面太窄。
论文题目不要太大。
依法治国、美国刑事诉讼法探讨等题目范围太大；沉默权的行使与限制、情势变更原则探讨、表见代理合同的效力、无权处分合同及相关法律制度等题目较为适中。当然，有时候也可以小题大做。
（二）制作写作提纲
选题确定，写作内容确定。
（三）初稿写作
在提纲确定的范围中，针对每一大问题准备阐述哪些内容，表明提纲的观点，自己收集的材料可以考虑切入。
（四）总体要求
论文写作有其要求，专业论文更加需要有观点、有内容。文章结构安排合理，语言阐述具有说服力，论证方法得当，逻辑严密。规范用语，不能口语化，专业词汇应该准确。
基本格式要求
一、论文基本组成部分：标题；单位、姓名；摘要；关键词；正文；注释或参考文献
二、文字编排要求：
论文整体编排上，页面设置默认格式，行间距1.2倍左右，整洁大方，疏密得当。具体要求：
1、标题：黑体，三号，居中
2、署名：单位与姓名之间空一字，宋体，小四号，与标题间距一行
3、摘要：与署名间距一行，首行缩进四字，“摘要”二字之间空一字，黑体，五号，后跟冒号；摘要内容楷体，五号，换行后文字缩进两字
4、关键词：首字与“摘要”对齐，黑体，五号，后跟冒号；关键词3或5个为宜，楷体，五号
5、正文：（1）与“关键词”间距一行；（2）宋体，小四号；（3）每段首行空两字；（4）文科各级目录方式：“一、”“（一）”“1、”“（1）”；（5）理科各级目录方式：“1.”“1.1”“1.1.1”；正文中如果直接引用一个或几个段落、一个或几个案例，一般独立成段，段落开头空四格，换行空两格，五号楷体字为宜。
6、注释或参考文献：与正文至少间距一行，“注释”或“参考文献”用黑体，五号，后跟冒号；在正文中须标出“[1]”、“[2]”……，然后在注释或参考文献后对应注明“[1]”、“[2]”……做注释或参考文献时须完整，不得残缺不全；注释或参考文献内容用宋体，五号。请详看第7条目。
7、做注释或参考文献，
第一种：传统形式
引自期刊： [1]作者：《题名》，《刊名》，××××年第×期，第×页。 引自专著： [2]作者：《书名》，出版地：出版者及××××年×版，第×页 引自报纸： [3]作者：《题名》，《报纸名》年-月-日（版次）
篇三：论文格式标准范本
论文格式标准范本
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